技術服務熱線:800-820-5086 | 400-880-5086 登錄 | 注冊 ENGLISH

蛋白質組-蛋白芯片-FullMoon蛋白芯片

FullMoon蛋白芯片介紹

蛋白質芯片技術是繼基因芯片技術后發展起來的生物檢測技術,是蛋白質組學研究中除了酵母雙雜交、雙向電泳技術、質譜技術等之外的一種重要的工具。蛋白質芯片技術具有平行、快速、自動化的優點,并且檢測到的平行數據誤差更小,更準確,這對于高通量的研究具有非常重要的意義。它的出現對于生物學、臨床檢驗醫學、遺傳學、腫瘤學等多學科的進步具有極大的推動作用。蛋白質芯片技術根據芯片上固定的物質不同又分為抗體芯片與蛋白芯片。

近幾年來,隨著抗體技術的發展,抗體庫的建設速度越來越快,生產了大量優質的抗體,從而推動了抗體芯片技術的發展與應用。抗體芯片技術在醫學領域的應用,帶動了相關科技論文的發表,數量與質量均呈上升趨勢。

上海伯豪生物技術有限公司引進國外知名抗體芯片技術公司(Full Moon Biosystems)公司的技術和產品,建立了豐富的抗體芯片技術平臺,推出的43余種抗體芯片可以用于檢測生理或病理過程相關蛋白的表達豐度、篩選疾病標志物、探索藥物作用機制、檢測信號通路中成員的激活狀態。使用的芯片產品已經在Nature Medicine, Journal of Clinical Investigation, Cancer Research, PLoS One, Journal of Biological Chemistry等專業學術雜志發表了高質量的論文。可以檢測的樣本包括培養的細胞、細胞培養上清、血清、血漿、冰凍組織、以及福爾馬林浸泡或者Trizol浸泡的組織,石蠟包埋組織和切片也可以進行應用。

 

FullMoon蛋白芯片檢測原理

 

蛋白芯片的應用

  1. 服務內容一:信號通路磷酸化水平檢測
    可逆的蛋白磷酸化反應調節著細胞的大部分功能。蛋白質的可逆磷酸化是細胞中普遍存在的一類酶促共價鍵化學修飾反應,通過可逆的磷酸化反應,導致蛋白質活性和功能的改變,從而影響和調節著細胞的各種功能,如能量儲存、細胞形態變化、蛋白質的合成、基因表達、信號因子的釋放、肌肉收縮以及細胞代謝等。
  2. 服務內容二:蛋白質表達水平檢測

 

服務流程

蛋白質抽提——抽提蛋白質生物素標記——標記后樣本與芯片雜交——芯片掃描,數據讀取與分析

 

樣品要求

  1. 細胞
    約1×107個貼壁細胞去培養基后,常溫PBS洗滌3次,直接加入裂解緩沖液,推薦使用Full Moon的Protein Extraction Buffer 或者RIPA Lysis Buffer,根據培養皿大小加入適量緩沖液,反復吹打,待細胞裂解后,收集溶液,4℃離心后收集上清,置-70℃冰箱保存,干冰運輸。
    懸浮培養細胞直接收集,收集約1×107個細胞,常溫PBS洗滌3次,低速離心沉淀細胞,棄去PBS(盡量去除干凈),直接加入裂解緩沖液,推薦使用Full Moon的Protein Extraction Buffer 或者RIPA Lysis Buffer,根據細胞數量加入適量緩沖液,按操作流程裂解后,4℃離心后收集上清,置-70℃冰箱保存,干冰運輸。
  2. 組織
    采集新鮮組織(注意:生物體血液限流后20分鐘內取材料并保存好),組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈(盡量洗凈血液),切為小塊,放入液氮速凍后-70℃保存,干冰運輸,或福爾馬林/TriZol中4℃保存,一周內,常溫運輸。
  3. 血清和血漿
    采集新鮮血液,切忌溶血。全血分離血清,或EDTA抗凝血分離血漿,取100-500微升置-20℃或-70℃冰箱保存,干冰運輸。。

 

案例分析

CXCL5(epithelial neutrophil-activating peptide-78)促進中性粒細胞浸潤并可作為肝癌預后的判斷指標

復旦大學中山醫院肝癌研究所癌變與侵襲教育部重點實驗室,復旦大學生物醫學研究院的研究人員證實趨化因子CXCL5在肝癌的腫瘤生長、侵襲及預后中發揮重要的作用。研究人員通過比較CXCL5在幾組具有不同轉移性能的肝癌細胞系和919名肝癌患者體內mRNA和蛋白水平的變化,結合磷酸化抗體芯片這種高通量的實驗平臺發現CXCL5主要通過激活PI3K-Akt 和 ERK1/2兩個信號通路促進肝癌的增殖、轉移和侵襲。另一方面,在體外實驗發現CXCL5對中性粒細胞具有直接趨化作用,而體內實驗也證明肝癌細胞中的CXCL5促進腫瘤的生長、肺轉移和瘤內中性粒細胞浸潤。免疫組化分析表明,肝癌中CXCL5的過表達與中性粒細胞的浸潤、患者總生存期短以及腫瘤復發相關。而多變量分析發現,單獨的CXCL5的過表達或其與瘤內中性粒細胞的存在狀態相結合,都可以作為一個新的預后衡量指標,同時CXCL5也可以作為肝癌一個新的治療靶點。

原文出處: Overexpression of CXCL5 Mediates Neutrophil Infiltration and Indicates Poor Prognosis for Hepatocellular Carcinoma.Hepatology.2012, 56(6) :2242-54.

相扑君的逆袭电子游戏 ag斗三公怎么玩能赢 排列五50期走势图 重庆时时app下载 雪缘园足彩比分直播 足彩赔钱 努力赚钱的词 怎样lol赚钱 今年干什么活最赚钱 乐平台 湖北快三玩法技巧规律 11选5任二稳赚好方法 棋牌斗三公游戏下载 网络彩票幸运飞艇骗局 包胆买二星组选技巧 双人麻将 内蒙古时时0624026期